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荧光标记的穿膜肽在肿瘤研究中的运用

        蛋白的磷酸化和去磷酸化状态在信号转导和肿瘤的发生中起重要作用,细胞穿膜肽(cellular- membrane permeable peptides CPP)在信号转导中起重要作用,并且它们具有自由移位的能力因此在这些领域显得更加的重要. CPP能携带多种分子负荷,包括蛋白,核酸及小的药物分子等。在肿瘤治疗研究中, 有多种方法可以导入肿瘤抑制分子进入靶细胞内, 比如病毒载体介导的转运系统和脂质体, 前者尽管可以高效地把外源基因导入各种细胞, 但是存在的安全问题妨碍了肿瘤治疗, 后者虽然体内毒性小, 但是转导效率不能令人满意。而CPP的研究将有可能发现一种高效的肿瘤治疗载体。 
        ANASPEC 的研发人员用FITC标记三种常见的CPP,(FITC-LC-Antennapedia, FITC-LC-TAT 和 FITC-LC-MTS), 并用于细胞培养板(chamber slide system)培养的细胞系A-431,HEK-293,3T3,MCF-7和HTB-10。荧光显微镜观察表明这些荧光标记的多肽能够以较高的效率进入到胞内,并且对于MCF-7细胞TAT有着明显的更加优秀的穿透能力,平行的Trypan Blue染色细胞存活实验发现即使FITC-CPP浓度大到100μM, 对细胞的存活也几乎没有影响, 表明FITC-CPP具有低的细胞毒性作用。进一步的试验以相应配体活化细胞后, 用5-FAM标记的磷酸丝氨酸单抗检测FITC-CPP存在对特异蛋白磷酸化的影响,结果表明FITC-CPP对细胞的活化和蛋白磷酸化没有影响。因此这些结果说明CPP很有可能成为新的强有力的肿瘤治疗工具。

 

 
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