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                      流式细胞术及其相关产品的实际应用

     流式细胞术是最发展起来的一项高新生物科学技术是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学和单克隆抗体技术、激光技术、计算机技术等学科高度发展,综合应用于临床医学研究及疾病的诊断及治疗的科学结晶。目前已广泛用于肿瘤、血液病、免疫性疾病、艾滋病、器官移植等方面的常规临床检测中,并已成为上述疾病诊断、治疗、疗效判断、预后估计等至关重要甚至唯一的方法。
        
流式细胞分析术(FCM)能从定量角度对细胞的各种形态学参数、生物学特征、细胞生华成分的组成及含量以及各种功能进行研究。

                                     流式细胞术抗体

       Sanquin是一家荷兰公司,是世界上流式细胞术抗体的主要供应商。该公司生产的各种单克隆抗体已被广泛应用于该领域的常规使用。其生产的单克隆抗体具有品种齐全,质量高,效率强的良好信誉。抗体用于分析细胞群体的组成,目前认为,应用此抗体对疾病的诊断、细胞学的研究具有极其重要的意义。

APC通过结合被分解的多肽在免疫反应中起作用,APC会将此多肽片段运至内质网腔,在此处与HLA一型分子结合。抗原多肽片段特定地与由不同的HLA等位基因编码的HLA结合。当它们以足够的亲和力结合,HLA-多肽复合体将被运送到细胞表面。在那儿,此复合物被T细胞的特异性抗原决定簇CD8+识别。这种识别引导T细胞的活化和进一步的免疫反应,同时导致与HLA-多肽复合体融解和脱离。T细胞识别HLA复合体的决定簇就像识别多肽一样,主要是基于以下特性:

T细胞在下列三种情况下会被HLA激活:在接触到同源基因表达的但不相配的HLA会起排斥反应或(一般出现在移植器官中);或接触到异态细胞蛋白作为的抗原多肽(例如肿瘤);或接触到病原体(例如细菌病毒等)。HLA除了与T细胞CD8+分子反应以及细胞内免疫反应,还与其他一种辅助T细胞CD4+分子反应。HLACD4+的反应有助于CD8+的活化以及进一步的免疫反应。事实上只有当表达有抗原肽-HLA复合物的APC,与起识别和反应作用的T细胞表面所表达的HLA 分子相同时,二者才能彼此作用而启动免疫应答过程,T细胞表面的TCR在识别抗原肽的过程中,其表面的CD4/CD8分子必须同时识别APC上的HLA-Ⅱ/Ⅰ型分子的Ig样区。T细胞通过产生必要的生长因子和细胞因子在免疫反应中扮演重要角色。CD4+识别HLA二型分子中特殊序列作为抗原 HLA二型分子位于APC表面,其与被细胞内吞的细胞外蛋白水解反应得到的多肽片段相结合。HerotoHLA二型分子通过与不同的降糖多肽结合在胞吞途径产生作用。在HLA分子到达细胞表面前,这些降糖多肽随后被水解,然后被由内吞作用得到的多肽所代替。为了优化抗原递呈和T细胞识别,个体内都有多种一型和二型HLA分子,这是由它们各自的亚基所区别的。HLA一型分子由一个恒定的β-微球蛋白亚基和一个变化的α亚基(含有抗原结合位点)。HLA一型分子和二型分子结构上基本一样,但二型分子的αβ亚基大小一样而且两者都含有与抗原结合的特殊位点。体外合成可溶性HLA-多肽复合物被用作多功能复合物在FACS中检测抗原特异性T细胞。

PeliClusterTM Monoclonal Antibodies

可用于流式细胞术的单标记单克隆抗体(FITC- PE-PE-Cy5-标记) 

包装为1 ml

Cluster Designation

Clone

Iso-

type

Neat

0.2MG

RUO

FITC

100test

CE IVD

PE

100test

CE IVD

PE-Cy5

100test

CE IVD

CD1a

WM35

IgG2b

M2120

M2255

M2140

 
CD2

CLB-T11/1, 6G4

IgG1

M1314

M1465

CD3

CLB-T3/2, 16A9

IgG2a

M1306

M1466

   
CD3

UCHT-1

IgG1

    M1741

M2292

CD4

CLB-T4/1, 10A12

IgG2a

M1308

     
CD4

CLB-T4/2, 6D10

IgG1

  M1467

M1648

 
CD4

S3.5

IgG2a

      M1753

CD5

CLB-T1/1, 1C12

IgG1

M1310

M1602

M1649

CD6

CLB-B6

IgG1

M1681

     
CD7

CLB-T-3A1/1, 7F3

IgG2a

M1339

M1567

CD8

CLB-T8/4, 4H8

IgG2b

M1312

M1468

M1629

 
CD8

3B5

IgG2a

      M1744

CD9

CLB-thromb/8, 4E1

IgG2a

M1362

M1666

CD10

CLB-CALLA/1, 4F9

IgG2a

M1337

M1603

M1692

CD11a

CLB-LFA-1/2, TB-133

IgG2a

M1385

M1667

   
CD11b

CLB-mon-gran/1, B2

IgM

M1386

M1668

CD13

CLB-mon-gran/2, Q20

IgG2a

M1387

M1568

M1726

 
CD14

CLB-mon/1, 8G3

IgG2a

M1388

M1430

M1661

CD14

TUK4

IgG2a

     
M1745

CD15

CLB-gran/2, B4

IgM

M1336

M1435

CD16

CLB-FcR gran/1, 5D2

IgG2a

M1389

M1604

M1690

CD16b

CLB-gran/11, 5D7

IgG2a

M1390

     
CD18

CLB-LFA-1/1, 54

IgG1

M1344

M1669

CD19

CLB-B4/1, 11G1

IgG1

M1345

M1436

M1588

 
CD19

J4.119

IgG1

    M2285

 
CD19

SJ25-C1

IgG1

   

M1746

CD20

NKI-IH4

IgG1

M1644

M1646

CD21

CLB-5D1

IgG1

M1723

M1834

   
CD22

CLB-B-Ly/1, 6B11

IgG1

M1391

M1437

M1727

CD23

Tü1

IgG3

  M2108

   
CD24

CLB-gran-B-ly/1, 1B5

IgG1

M1361

M1605

 

CD25

CLB-IL2R/1, TB30

IgG2b

M1335

M1680

M1728

CD26

CLB-22C3

IgG1

M1696

     
CD27

CLB-CD27/1, 9F4

IgG2a

M1455

M1764

CD28

CLB-CD28/1, 15E8

IgG1

M1456

 

CD28

KOLT-2

IgG1

M2241

M2180

   
CD29

2A4

IgG1

M2129

M2233

CD30

HSR-4

IgG1

M2283

     
CD31

CLB-HEC/75

IgG1

M1536

M1670

CD32

CIKm5

IgG1

M2202

     
CD33

CLB-MD33.6

IgG1

M1585

M1606

M1662

CD34

ClassI: MD34.2

IgG1

M1636

   

CD34

ClassII: QBEnd10

IgG1

 
M2110

M2281

CD34

ClassIII: 581

IgG1

    M2284

 
CD35

E11

IgG1

M2122

M2136

CD36

CLB-IVC7

IgG1

M1537

M1613

   
CD37

NMN46

IgG2a

  M2139

CD38

CLB-ID5

IgM

M1642

M1785

 

CD38

HIT2

IgG1

 
M2286

CD40

CLB-14G7

IgM

M1691

CD41

CLB-thromb/7, 6C9

IgG1

M1538

M1674

 

CD41

M148

IgG1

    M2280

 
CD42b

CLB-MB45

IgG1

M1539

M1638

M1729

CD42b

CLB-MB15

IgG1

M1851

  M1852

 
CD42d

CLB-SW16

IgG1

M1637

     
CD43

DFT-1

IgG1

M2242

M2183

CD44

NKI-P2

IgG1

M1676

M1678

   
CD45

CLB-T200/1, 15D9

IgG1

M1343

M1491

M1596

CD45

HI30

IgG1

   

M1747

CD45R0

UCHL1

IgG2a

M2232

M2113

CD45RA

F8-11-13

IgG1

M2111

M2146

M2112

 
CD46

J4-48

IgG1

M2148

CD47

BRIC126

IgG2b

M2149

     
CD48

MEM102

IgG1

M2150

CD49b

CLB-thromb/4, 10G11

IgG1

M1540

M1671

CD49c

11G5

IgG1

M2151

     
CD49d

15A8

IgG1

M2152

 

CD49e

NKI-SAM1

IgG2b

M1586

     
CD49f

NKI-GoH3

IgG2a

M1566

M1672

   
CD51

NKI-M9

IgG1

M1541

     
CD53

MEM53

IgG1

M2114

     
CD54

15.2

IgG1

M2115

M2154

CD55

BRIC110

IgG1

M2156

M2192

   
CD56

NKI-nbl-1

IgG1

M1645

CD56

B159

IgG2a

    M2277

 
CD57

NC1

IgM

M2204

M2272

CD58

BRIC5

IgG2a

M2157

     
CD59

MEM43

IgG2a

M2121

M2191

CD61

CLB-thromb/1, C17

IgG1

M1355

M1592

   
CD62P

CLB-thromb/6, C2

IgG1

M1543

M1706

CD62P

AK6

IgG1

 
M2187

CD63

CLB-gran/12, 435

IgG1

M1544

M1698

CD64

10.1

IgG1

M2159

 

CD65

88H7

IgM

M1719

M1720

CD66b

CLB-B13.9

IgG1

M1546

M1594

   
CD66acde

CLB-gran/10, IH4Fc

IgG1

M1545

M1643

M1693

 
CD69

TP1.55.3

IgG2b

   
M2282

CD70

CLB-2F2

IgG1

M1705

     
CD71

RVS10

IgG1

M2160

M2162

M2119

 
CD74

BU45

IgG1

M2163

   

CD80

CLB-DAL1

IgG1

M1708

     
CD95

FAS18

IgG2a

M1714

CD95

FAS19

IgG1

M1715

M1735

CD103

2G5

IgG2a

M1721

M1722

CD105

CLB-HEC-19

IgG1

M1765

     
CD122

MIK-b1

IgG2a

M2172

M2189

CD138

CLB-1D4

IgG1

M1663

  M2287

 
CD235a

CLB-AME-1

IgG1

M1365

M1593

M1732

单标记对照抗体:

Controls

Iso-type

Neat

FITC-label

PE-label

PE-Cy5

IgG1

IgG1

M1451

M1453

M1628

 

IgG2a

IgG2

M1452

M1454

M1697

M1748

IgG2b

IgG2b

M2173

M2190

M2230

 

CD抗体/颗粒酶抗体

Antibody

Clone

Iso-type

Neat

FITC

-label

PE

-label

Biotin

-label

Ery-H/1

CLB-7C11

IgM

M1392

 
MPO

CLB-MPO-1/1, 7.17

IgG1

M1464

M1703

 
LTF

CLB-13.17

IgG1

M1700

  M1731

 
HLA-DR

CLB-HLA-DR, 1E5

IgG1

M1338

M1607

   
ANCA

CLB-12.8

IgG1

M1574

   
GA6

Granzyme A

IgG1

M1791

     
GA28

Granzyme A

IgG1

M1766

    M1798

GA29

Granzyme A

IgG1

M1767

     
GB7

Granzyme B

IgG2a

M1754

     
GB10

Granzyme B

IgG1

M1755

    M1793

GB11

Granzyme B

IgG1

M1756

  M2289

M1794

GB12

Granzyme B

IgG1

M1757

    M1759

PeliDuo™  Monoclonal Antibodies Set

用于流式细胞的双标单克隆抗体(FITC / PE标记)

包装为1 ml,可以进行50检测

Antibody combinations 50 tests

Clone

Iso-type

Order number

CE IVD

CD2 FITC / CD19 PE

CLB-T11/1 / CLB-B4/1

IgG1/IgG1

M1624

CD3 FITC / CD4 PE

CLB-T3/2 / CLB-T4/2

IgG2a/IgG1

M2247

CD3 FITC / CD8 PE

CLB-T3/2 / CLB-T8/4

IgG2a/IgG2b1

M1598

CD3 FITC / CD16 PE

CLB-T3/2 / CLB-FcRgran/1

IgG2a/IgG2b

M1724

CD3 FITC / CD19 PE

CLB-T3/2 / CLB-B4/1

IgG2a/IgG1

M1699

CD4 FITC / CD8 PE

CLB-T4/2 / CLB-T8/4

IgG1/IgG2b

M1599

CD14 FITC / CD45 PE

CLB-mon/1 / CLB-T200/1

IgG2a/IgG1

M1626

CD45 FITC / CD14 PE

CLB-T200/1 / CLB-mon/1

IgG1/IgG1

M2248

双标记对照抗体:

Controls

Iso-type

Order number

IgG1-FITC/IgG1-PE

IgG1/ IgG1

M1627

IgG2a-FITC/IgG1-PE

IgG2a/ IgG1

M2251

PeliTrio™ Monoclonal Antibodies

用于流式细胞的三标单克隆抗体(FITC / PE / PE-Cy5标记) 

包装:1ml 可做100检测 (including lysing solution*)

Antibody combinations 100 tests

Clone

Order number
CE IVD

CD4 FITC / CD8 PE / CD3 PE-Cy5

CLB-T4/2 / CLB-T8/4 / UCHT-1S4.1

M1825.s

CD16 FITC / CD19PE / CD3 PE-Cy5

3G8 / 4G7 / UCHT-1

M1799.s

三标记对照抗体

control IgG2a FITC / IgG2a PE / IgG2a PE-Cy5

M1826.s

PeliClusterTM Cell-Stimulating Antibodies

用于T细胞的增殖和功能研究的淋巴细胞刺激的单克隆抗体

包装:0.1 ml (2 mg/mL)

Antibody

Order number

Isotype

Clone name

Application

CD2

M1651

IgG1

CLB-T11.1/, 6G4

T cell stimulation

CD2

M1652

IgG1

CLB-T11.2/, 4B2

T cell stimulation

CD2

M1653

IgG1

CLB-HIK27

T cell stimulation

CD3

M1654

IgE

CLB-T3/4E, 1XE

T cell stimulation

CD3

M1665

IgG1

CLB-T3/2, 16A9

T cell stimulation

CD28

M1650

IgG1

CLB-CD28/1, 15E8

T cell co-stimulation

PeliTrio monoclonal antibodies for use in ORTHO ImmunoCount system

PeliTrio单克隆抗体用于ORTHO免疫计数

100 tests(Including lysing solution)

Antibody combinations

Order number

CD4 FITC / CD8 PE / CD3 PE-Cy5

M1825.s

CD16 FITC / CD19 PE / CD3 PE-Cy5

M1799.s

Isotype control

 

IgG2a FITC / IgG2a PE / IgG2a PE-Cy5

M1826.s

Lysing solution

Lysing solution (300 tests)

M7101.6

                      MHC四聚体(人、小鼠)- PeliMersTM

Sanquin是世界上MHC四聚体的主要供应商。除提供重组MHC外,Sanquin还为客户合成 MHC-Peptide化合物的专业公司,它能根据客户所提供的肽序列,为客户合成特殊的MHC-Peptide化合物。

    MHC四聚体是第一种可在流式中鉴别抗原特异性T细胞的试剂,其革命性改进了免疫学研究。该技术逐渐被认为是定量T细胞免疫反应的金标准。其最初的文献(Phenotypic Analysis of Antigen-Specific T Lymphocytes; Altman, John et. al. Science 1996 274: 94-96.)已被引用超过500次。用MHC-肽四聚体可在流式细胞仪上从大量细胞中检测和分离抗原特异性T细胞。可用于分析新鲜或冰冻细胞。不仅节约时间,而且更精确。细胞表型分析可以与细胞内细胞因子检测同时分析,使您在一次分析中了解细胞的特性和激活状态

Sanquin提供各种包装PeliMers MHC四聚体

10 Test50 Test250 Test

Human

Epitope

Allele

Description

Order code

Virus antigens

FLU

CTELKLSDY

A*0101

PeliMer A1/FLU PE

M2425CTELK

VSDGGPNLY

A*0101

PeliMer A1/FLU PE

M2425VSDGG

HIV

SLYNTVATL

A*0201

PeliMer A2/HIV-gag PE

M2427SLYNT

SLYNTVATL

A*0201

PeliMer A2/HIV-gag APC

M2428SLYNT

RLRPGGKKK

A*0301

PeliMer A3/HIV-gag PE

M2429RLRPG

RLRPGGKKK

A*0301

PeliMer A3/HIV-gag APC

M2430RLRPG

IVLPEKDSW

B*5701

PeliMer B57/HIV-pol PE

M2439IVLPE

KAFSPEVIPMF

B*5701

PeliMer B57/HIV-gag PE

M2439KAFSP

CMV

NLVPMVATV

A*0201

PeliMer A2/CMV (pp65)

M2427NLVPM

EBV

RLRAEAQVK

A*0301

PeliMer A3/EBV PE

M2429RLRAE

KIRLRPGGK

A*0301

PeliMer A3/EBV APC

M2430KIRLR

IVTDFSVIK

A*1101

PeliMer A11/EBV PE

M2431IVTDF

AVFDRKSDAK

A*1101

PeliMer A11/EBV PE

M2431AVFDR

AVFDRKSDAK

A*1101

PeliMer A11/EBVAPC

M2432AVFDR

RPPIFIRRL

B*0702

PeliMer B7/EBV PE

M2433RPPIF

RPPIFIRRL

B*0702

PeliMer B7/EBV APC

M2434RPPIF

RAKFKQLL

B*0801

PeliMer B8/EBV PE

M2435RAKFK

EPLPQGQLTAY

B*3501

PeliMer B35/BZLF1 PE

M2437EPLPQ

HPVGEADYFEY

B*3501

PeliMer B35/EBNA1 PE

M2437HPVGE

RSV

*

A*0201

PeliMer A2/RSV APC

M2428O2927

*

B*0702

PeliMer B7/RSV APC

M2434O2936

TPKGPSLRV

B*0702

PeliMer B7/RSV APC

M2434TPKGP

HBV

FLLSLGIHL

A*0201

PeliMer A2/HBV-pol PE

M2427FLLSL

FLPSDFFPSV

A*0201

PeliMer A2/ HBV-core PE

M2427FLPSD

WLSLLWPFV

A*0201

PeliMer A2/ HBV-env PE

M2427WLSLL

HPV

KLPQLCTEL

A*0201

PeliMer A2/HPV PE

M2427KLPQL

Tumour antigens

TUMOUR

YMDGTMSQV

A*0201

PeliMer A2/ Tyrosinase PE

M2427YMDGT

RMFPNAPYL

A*0201

PeliMer A2/ WT-1 PE

M2427RMFPN

小鼠

Mu

r

I

N

e

Epitope

Allele

Description

Order code

SIINFEKL

H2-Kb

PeliMer H2-Kb / OVA APC

M2711SIINF

SVYDFFVWL

H2-Kb

PeliMer H2-Kb /TRP-2 APC

M2711SVYDF

ASNENMDAM

H2-Db

PeliMer H2-Db /F5 PE

M2712ASNEN

KCSRNRQYL

H2-Db

PeliMer H2-Db / HY PE

M2712KCSRN

RAHYNIVTF

H2-Db

PeliMer H2-Db / PE

M2712RAHYN

ASNENMDAM

H2-Db

PeliMer H2-Db / F5 APC

M2713ASNEN

KCSRNRQYL

H2-Db

PeliMer H2-Db / HY APC

M2713KCSRN

 
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